品牌 | 其他品牌 | 货号 | BFN60800695 |
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规格 | T25培养瓶x1 1.5ml冻存管x2 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
细胞名称 | 人肝癌细胞BEL-7402 | ||
货物编码 | BFN60800695 | ||
产品规格 | T25培养瓶x1 | 1.5ml冻存管x2 | |
细胞数量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存温度 | 37℃ | -198℃ | |
运输方式 | 常温保温运输 | 干冰运输 | |
安全等级 | 1 | ||
用途限制 | 仅供科研用途 2类 |
培养体系 | DMEM高糖培养基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%双抗(Hyclone) | ||
培养温度 | 37℃ | 二氧化碳浓度 | 5% |
简介 | 人肝癌细胞BEL-7402细胞株是1974年从临床肝癌手术标本中建立的。细胞群体倍增时间为20小时。移植到处理过的wistar大鼠中的能形成肿瘤结节。细胞形态呈上皮样细胞。在电子显微镜下亦显示上皮细胞所具有的桥粒和张力原纤维,与临床肝癌细胞相似。分瓶培养第四天时,其有丝分裂指数约为7%。BEL-7402细胞的染色体数为不足三倍体,有一个异常的近端着丝点染色体。间接免疫荧光法测BEL-7402细胞内的AFP为阳性反应。LDH同工酶谱显示与成年人肝细胞不同,而与人胚肝及临床肝癌相近。 | ||
注释 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=28807831). Originally thought to originate from a 53 year old male patient hepatocellular carcinoma. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00549. Doubling time: 20 hours (PubMed=6154311); 31.2 +- 1.1 hours (PubMed=23167424). Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Deep quantitative proteome analysis. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. | ||
STR信息 | Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:12;D7S820:12;D8S1179:12;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:12;vWA:16,18 | ||
参考文献 | PubMed=6154311; DOI=10.1360/ya1980-23-2-236 Chen R.-M., Zhu D.-H., Ye X.-Z., Shen D.-W., Lu R.-H. Establishment of three human liver carcinoma cell lines and some of their biological characteristics in vitro. Sci. Sin. 23:236-247(1980)
PubMed=6275024; DOI=10.1099/0022-1317-57-1-95 Koshy R., Maupas P., Muller R., Hofschneider P.H. Detection of hepatitis B virus-specific DNA in the genomes of human hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis tissues. J. Gen. Virol. 57:95-102(1981)
DOI=10.1007/978-4-431-68349-0_4 Alexander J.J. Human hepatoma cell lines. (In) Neoplasms of the liver; Okuda K., Ishak K.G. (eds.); pp.47-56; Springer; Tokyo (1987)
PubMed=1849045 Fuhrer J.P., Xie H., Murphy M.J. Jr., Ye J.N., Yao Z. Characterization of a membrane-associated glycoprotein (gp 43) on human hepatocellular carcinoma by a monoclonal antibody. Cancer Res. 51:2158-2163(1991)
PubMed=14571772 Liu L.-X., Jiang H.-C., Liu Z.-H., Zhu A.-L., Zhou J., Zhang W.-H., Wang X.-Q., Wu M. Gene expression profiles of hepatoma cell line BEL-7402. Hepato-Gastroenterol. 50:1496-1501(2003)
PubMed=23167424; DOI=10.7314/APJCP.2012.13.9.4807 Gu W., Fang F.-F., Li B., Cheng B.-B., Ling C.-Q. Characterization and resistance mechanisms of a 5-fluorouracil-resistant hepatocellular carcinoma cell line. Asian Pac. J. Cancer Prev. 13:4807-4814(2012)
PubMed=23505090; DOI=10.1002/hep.26402 Wang K., Lim H.Y., Shi S., Lee J., Deng S., Xie T., Zhu Z., Wang Y., Pocalyko D., Yang W.J., Rejto P.A., Mao M., Park C.-K., Xu J. Genomic landscape of copy number aberrations enables the identification of oncogenic drivers in hepatocellular carcinoma. Hepatology 58:706-717(2013)
PubMed=28807831; DOI=10.1016/j.jhep.2017.08.002 Rebouissou S., Zucman-Rossi J., Moreau R., Qiu Z.-X., Hui L.-J. Note of caution: contaminations of hepatocellular cell lines. J. Hepatol. 67:896-897(2017) |
验收细胞注意事项
1、收到人肝癌细胞BEL-7402细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到人肝癌细胞BEL-7402细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人肝癌细胞BEL-7402细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。
4、收到人肝癌细胞BEL-7402细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以备不时之需。
6、24 小时后,人肝癌细胞BEL-7402细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2 培养。
特别提醒: 原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。