品牌 | 其他品牌 | 货号 | BFN608006464 |
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规格 | T25培养瓶x1 1.5ml冻存管x2 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
细胞名称 | 人自然杀伤性细胞NK92 | ||
货物编码 | BFN608006464 | ||
产品规格 | T25培养瓶x1 | 1.5ml冻存管x2 | |
细胞数量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存温度 | 37℃ | -198℃ | |
运输方式 | 常温保温运输 | 干冰运输 | |
安全等级 | 1 | ||
用途限制 | 仅供科研 3类 |
培养体系 | The base medium for this cell line is Alpha Minimum Essential medium without ribonucleosides and deoxyribonucleosides but with 2 mM L-glutamine and 1.5 g/L sodium bicarbonate . To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: 0.2 mM inositol; 0.1 mM 2-mercaptoethanol; 0.02 mM folic acid; 100-200 U/ml recombinant IL-2; adjust to a final concentration of 12.5% horse serum and 12.5% fetal bovine serum. | ||
培养温度 | 37℃ | 二氧化碳浓度 | 5% |
简介 | 人自然杀伤性细胞NK92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。NK-92MI是转染得到的源自NK-92的IL-2非依赖的NK细胞株,亲本细胞通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2cDNA进行转化。可能由于载体整合到基因组DNA中,转化是稳定的。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞有以下特征:CD2 +, CD7 +, CD11a +, CD28 + , CD45 +, CD54 +, CD56 +, CD1 -, CD3 -, CD4 -, CD5 -, CD8 -, CD10 -, CD14 -, CD16 -, CD19 -, CD20 -, CD23 -, CD34 -, HLA-DR -。另本库保藏有NK92MI细胞。二者均引种自ATCC。 | ||
补充 | NK92细胞培养时,会有零星聚团现象,此时吹打散开即可。处于平台期的细胞,会有少量呈现略不规则的圆形,此为正常现象。血清建议使用BCK北美胎牛血清(货号BCK041)与BCK马血清(货号BCK045)。 | ||
注释 | Part of: LL-100 blood cancer cell line panel. Characteristics: Laboratory use as a standard cell line for antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) testing. Also bBeing developed for cellular adoptive immunotherapy for cancers and viral infections. Characteristics: IL2 dependent. Characteristics: Does not express FCGR3A/CD16. Doubling time: 35.6 +- 6.1 hours (PubMed=31126350); ~40-50 hours (DSMZ). Transformant: NCBI_TaxID; 10376; Epstein-Barr virus (EBV). Omics: Deep exome analysis. Omics: Deep RNAseq analysis. Omics: Transcriptome analysis. Miscellaneous: Neukoplast is used as a trademark to refer to NK-92 cells that are available for non-human research applications while aNK is used as a trademark to refer to cells from the cGMP-grade NK-92 cell-line that is in use for therapeutic human testing. Caution: This cell line is exclusively owned and controlled by NantKwest, Inc. NantKwest and its affiliate, Brink Biologics, Inc. are the sole authorized distributors for both commercial and non-commercial research requestors. There are no other authorized commercial and noncommercial suppliers of NK-92 cells. Contact NantKwest and Brink Biologics for information concerning current inventory and cell line use and support. Derived from sampling site: Peripheral blood. | ||
STR信息 | Amelogenin X,Y CSF1PO 11,12 D5S818 12,13 D7S820 10,11 D13S317 9,12 D16S539 11,12 TH01 6,9.3 TPOX 8 vWA 18 (ATCC) 16,18 (DSMZ) | ||
参考文献 | PubMed=25586472; DOI=10.1038/ncomms7025 Kucuk C., Jiang B., Hu X., Zhang W., Chan J.K.C., Xiao W., Lack N., Alkan C., Williams J.C., Avery K.N., Kavak P., Scuto A., Sen E., Gaulard P., Staudt L.M., Iqbal J., Zhang W., Cornish A., Gong Q., Yang Q., Sun H., d'Amore F., Leppa S., Liu W., Fu K., de Leval L., McKeithan T., Chan W.C. Activating mutations of STAT5B and STAT3 in lymphomas derived from gammadelta-T or NK cells. Nat. Commun. 6:6025-6025(2015)
PubMed=26559813; DOI=10.1007/s00262-015-1761-x Suck G., Odendahl M., Nowakowska P., Seidl C., Wels W.S., Klingemann H.-G., Tonn T. NK-92: an 'off-the-shelf therapeutic' for adoptive natural killer cell-based cancer immunotherapy. Cancer Immunol. Immunother. 65:485-492(2016)
PubMed=31126350; DOI=10.1186/s40425-019-0612-2 Yang H.G., Kang M.C., Kim T.Y., Hwang I., Jin H.T., Sung Y.C., Eom K.-S., Kim S.W. Discovery of a novel natural killer cell line with distinct immunostimulatory and proliferative potential as an alternative platform for cancer immunotherapy. J. Immunother. Cancer 7:138-138(2019)
PubMed=31160637; DOI=10.1038/s41598-019-44491-x Quentmeier H., Pommerenke C., Dirks W.G., Eberth S., Koeppel M., MacLeod R.A.F., Nagel S., Steube K., Uphoff C.C., Drexler H.G. The LL-100 panel: 100 cell lines for blood cancer studies. Sci. Rep. 9:8218-8218(2019) |
验收细胞注意事项
1、收到人自然杀伤性细胞NK92细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到人自然杀伤性细胞NK92细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人自然杀伤性细胞NK92细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。
4、收到人自然杀伤性细胞NK92细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以备不时之需。
6、24 小时后,人自然杀伤性细胞NK92细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2 培养。
特别提醒: 原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。